ELISA试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中26S蛋白酶体(26S PSM)的活性。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人26S蛋白酶体(26S PSM)水平。用纯化的人26S蛋白酶体(26S PSM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入26S蛋白酶体(26S PSM),再与HRP标记的26S蛋白酶体(26S PSM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的26S蛋白酶体(26S PSM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人26S蛋白酶体(26S PSM)活性浓度。
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
https://www.chem17.com/st523160/product_36937929.html
http://www.ylkbio.com/SonList-2356046.html